Práctica 11. APIS

OBJETIVOS

  •  El objetivo de esta práctica es realizar la prueba de los APIs para ver qué tipo de microorganismo tenemos.

FUNDAMENTOS

  • La batería de pruebas API20E es un sistema de identificación rápida para bacterias de la familia Enterobacteriaceace y otras bacterias Gram (-).
  • Consta de 21 test bioquímicos estandarizados y miniaturizados y una base de datos. Es rápido, eficaz y permite realizar numerosas pruebas a la vez.

MATERIALES
API20E
SSF
Mechero Bunsen





PROCEDIMIENTO
  1. Inoculamos tres o cuatro colonias del microorganismo en 5 mL de suspensión salina fisiológica.
  2. Introducimos la suspensión en los tubos de la galería con una pipeta Pasteur.
  3. Los pocillos que tienen el siguiente dibujo, se llena el tubo y la cúpula con la suspensión.
  4. Para las otras pruebas, únicamente llenamos los tubos.
  5. Para ADH, LDC, ODC, H2S Y URE, creamos una atmósfera anaerobia llenando la cúpula con aceite de parafina.
  6. Ponemos la tira en su propia cámara húmeda de incubación. Previamente debemos poner agua en los alvéolos de la cámara.
  7. Cerramos la cámara eincubamos a 37ºC durante 18-24 horas.

RESULTADOS

  • Como tres o más test son positivos, podemos proceder a realizar la lectura.
  • Leemos las pruebas y anotamos resultados.
  • Pruebas que necesitan reactivos:
    • TDA. Fenilalanina. Añadimos una gota de Fe3Cl. Marrón significa positivo.
    • VP. Añadir una gota del reactivo . Transparente significa negativo.
    • Indol. Añadimos una gota de reactivo de James. Rosa significa positivo.
    • Oxidasa. Azul es positivo.

  • El resultado obtenido tiene el código: 0066000

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